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聊一聊平板菌落計(jì)數(shù)法具體指的是什么
更新時(shí)間：2022-08-30 文章更新于2022-08-30 點(diǎn)擊次數(shù)：1323次
菌落是指細(xì)菌在固體培養(yǎng)基上生長繁殖而形成的能被肉眼識別的生長物，它是由數(shù)以萬計(jì)相同的細(xì)菌集合而成。當(dāng)樣品被稀釋到一定程度，與培養(yǎng)基混合，在一定培養(yǎng)條件下，每個(gè)能夠生長繁殖的細(xì)菌細(xì)胞都可以在平板上形成一個(gè)可見的菌落。
平板菌落計(jì)數(shù)法是指在活菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)時(shí).由單個(gè)菌體或聚集成團(tuán)的多個(gè)菌體在固體培養(yǎng)基上生長繁殖所形成的集落.稱為菌落形成單位，以其表達(dá)活菌的數(shù)量。菌落形成單位的計(jì)量方式與一般的計(jì)數(shù)方式不同，一般直接在顯微鏡下計(jì)算細(xì)菌數(shù)量會將活與死的細(xì)菌全部算入，但是CFU只計(jì)算活的細(xì)菌。因此，可將菌液倍比稀釋成不同濃度，每種濃度吸1毫升加到融化溫度達(dá)50度的15毫升營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)中混勻使其凝固，置35度孵育24小時(shí)，取出進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，每個(gè)平板菌落數(shù)X稀釋倍數(shù)得到每毫升中細(xì)菌數(shù)量，取平均值即可得到較準(zhǔn)確的CFU/ml，一般對平板進(jìn)行菌落計(jì)數(shù)，選擇菌落數(shù)在30到300個(gè)平板為準(zhǔn)。個(gè)單位比“菌落數(shù)”更準(zhǔn)確反映問題的實(shí)質(zhì)。從理論上認(rèn)識，一個(gè)活細(xì)菌可以在條件合適的固體表面上形成一個(gè)菌落，但實(shí)際上遠(yuǎn)非如此。例如，在環(huán)境因素作用下，每一個(gè)細(xì)菌的生活能力各不相同，會影響其在該條件下形成菌落的能力；又如，吸附于微小顆粒上的2個(gè)以上菌體或粘連在一起的菌團(tuán)可能共同形成一個(gè)菌落等等。致使形成的菌落數(shù)遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于實(shí)際的活菌數(shù)。因此目前可用菌落形成單位代替以往常用的“菌落數(shù)”單位。
平板菌落計(jì)數(shù)法是將待測樣品經(jīng)適當(dāng)稀釋之后，其中的微生物充分分散成單個(gè)細(xì)胞，取一定量的稀釋樣液涂布到平板上，經(jīng)過培養(yǎng)，由每個(gè)單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個(gè)單菌落應(yīng)代表原樣品中的一個(gè)單細(xì)胞。統(tǒng)計(jì)菌落數(shù)，根據(jù)其稀釋倍數(shù)和取樣接種量即可換算出樣品中的含菌數(shù)。但是，由于待測樣品往往不宜*分散成單個(gè)細(xì)胞，所以，長成的一個(gè)單菌落也可能來自樣品中的2～3或更多個(gè)細(xì)胞。因此平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果往往偏低。為了清楚地闡述平板菌落計(jì)數(shù)的結(jié)果，現(xiàn)在已傾向使用菌落形成單位(cfu：colony-forming units)，而不以菌落數(shù)來表示樣品的活菌含量。
