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內(nèi)酰胺酶檢測(cè)方法較為多樣
更新時(shí)間：2023-04-24 文章更新于2023-04-24 點(diǎn)擊次數(shù)：598次
內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)是一種廣泛存在于細(xì)菌種群中的酶類，其對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素的分解作用已成為目前細(xì)菌耐藥性的重要機(jī)制之一。因此，內(nèi)酰胺酶檢測(cè)已成為臨床醫(yī)生確定細(xì)菌感染耐藥性及制定針對(duì)性治療方案的重要方法。
內(nèi)酰胺酶的檢測(cè)方法較為多樣，包括酶活測(cè)定、基因檢測(cè)、酶免疫學(xué)檢測(cè)、質(zhì)譜檢測(cè)等。其中，酶活測(cè)定是一種經(jīng)典的方法，其基本原理是將待檢測(cè)的菌株施加于含內(nèi)酰胺酶底物的瓊脂板上，通過比較菌落周圍熒光圈的直徑或反應(yīng)時(shí)間，判斷內(nèi)酰胺酶是否存在及其活性大小。尤其在發(fā)生感染變異、產(chǎn)生耐藥突變或被選擇性壓力過濾等情況下，這種方法常常顯得格外靈敏。
酶活測(cè)定具有操作簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)實(shí)惠、金標(biāo)準(zhǔn)作用等優(yōu)點(diǎn)，但也存在著適用范圍狹窄、無法區(qū)分不同酶型、與物理因素相互干擾等缺點(diǎn)。因此，在實(shí)際進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，往往需要結(jié)合多種方法進(jìn)行分析研判，使結(jié)果得到更準(zhǔn)確、更可靠的評(píng)估。
基因檢測(cè)作為內(nèi)酰胺酶檢測(cè)的新興方法，憑借著其能夠直接檢測(cè)與酶活性相關(guān)的β-內(nèi)酰胺酶基因本體、檢測(cè)速度較快、檢測(cè)靈敏度及特異性高、結(jié)果可靠性高等優(yōu)勢(shì)，已成為近年來常用的檢測(cè)方法之一。目前，PCR技術(shù)和DNA基因芯片技術(shù)成為應(yīng)用廣泛的基因檢測(cè)方法。
酶免疫學(xué)檢測(cè)則是一種利用內(nèi)酰胺酶特異性抗體對(duì)其進(jìn)行檢測(cè)的方法，其基本原理是通過將抗體捕獲內(nèi)酰胺酶，再添加辣根過氧化物酶標(biāo)記的二抗體，通過化學(xué)反應(yīng)得到顏色的變化以判斷酶是否存在。該方法具有響應(yīng)快、可定量檢測(cè)、能夠鑒定多種酶型等優(yōu)勢(shì)，但其靈敏度略低于基因檢測(cè)。
另外，質(zhì)譜檢測(cè)則是一種非常靈敏的檢測(cè)手段，其基本原理是將蛋白質(zhì)樣本載入質(zhì)譜儀中，利用質(zhì)子或離子作為荷載掃描樣本，根據(jù)蛋白質(zhì)質(zhì)量的不同獲得蛋白質(zhì)質(zhì)譜圖，通過質(zhì)譜圖的比對(duì)來確定內(nèi)酰胺酶指紋。質(zhì)譜法具有全面準(zhǔn)確、定量檢測(cè)、高通量等優(yōu)勢(shì)，但其設(shè)備要求高，操作難度大，且檢測(cè)成本昂貴。
內(nèi)酰胺酶檢測(cè)是一項(xiàng)十分重要的臨床檢測(cè)項(xiàng)目，無論使用哪種方法，其目的均是要對(duì)于患者的病情進(jìn)行更加精確的分析、進(jìn)而定出更為科學(xué)合理的治療方案。同時(shí)，我們也需要在不斷探索新的檢測(cè)技術(shù)的同時(shí)，不斷提升現(xiàn)有檢測(cè)方法的檢測(cè)準(zhǔn)確度和穩(wěn)定性，從而在臨床中得到更好的應(yīng)用效果。
